負80度低溫冰箱，也被稱為-80度冰箱或超低溫冰箱，是一種極低溫儲存設備，可將物品存儲在-80℃以下的溫度下。其一般采用壓縮機制冷技術，內部精密的控溫系統可以控制溫度。其保溫材料使用先進的發泡材料，確保絕緣效果，降低能量損失。部分高型號如賽默飛-80度超低溫冰箱，通過雙級壓縮機制冷系統實現極低溫度的維持，確保冰箱內部溫度的均勻性和穩定性。
一、樣本準備與包裝
選擇合適的容器：
使用耐低溫凍存管（cryovials），材質通常為聚丙烯（PP），可承受-196℃液氮溫度。
常見規格：0.5 mL、1.5 mL、2.0 mL、5.0 mL，帶螺口蓋或旋蓋。
確保凍存管密封性良好，防止“爆管”或交叉污染。
正確標記：
在凍存管側面用耐低溫記號筆或標簽紙清晰標注樣本信息（如名稱、日期、濃度、操作者等）。
避免僅在管蓋上標記，以防脫落。
建議使用條形碼或二維碼系統進行數字化管理。
添加保護劑（如需要）：
對于細胞、組織等活體樣本，應加入冷凍保護劑（如10%DMSO或FBS），防止冰晶形成造成損傷。
蛋白質溶液可加入甘油（終濃度10-50%）以穩定結構。
分裝保存：
將大體積樣本分裝成小份（如1 mL/管），避免反復凍融導致活性下降。
每次取用一份，減少其他樣本暴露于高溫的風險。
二、凍結過程（程序降溫）
程序降溫儀（推薦）：
使用專用程序降溫儀，設定降溫速率（通常為-1℃/min），從室溫降至-80℃或直接降至液氮氣相。
這是安全、有效的細胞凍存方法。
異丙醇凍存盒（替代方法）：
將凍存管放入裝有異丙醇的凍存盒中，再置于-80℃冰箱。
異丙醇的比熱容大，能實現約-1℃/min的降溫速率。
優點：成本低；缺點：異丙醇需定期補充，降溫速率受環境影響。
直接放入-80℃冰箱（不推薦用于細胞）：
僅適用于對凍融不敏感的生物分子（如DNA、部分酶溶液）。
細胞、組織等活體樣本嚴禁直接放入，會導致大量死亡。
三、存放與管理
合理分區存放：
將冰箱內部分為不同區域（如按項目、樣本類型、日期），使用凍存架、凍存盒進行分類。
避免雜亂堆放，便于查找和減少開門時間。
使用凍存盒：
將凍存管放入標準尺寸的凍存盒（如9×9格），盒外貼標簽。
凍存盒可堆疊，提高空間利用率。
避免頻繁開關門：
開門會導致溫度劇烈波動（可達-40℃甚至更高），影響樣本穩定性。
提前規劃取樣，快速操作，關門后等待恢復再開。
保持冰箱負載適中：
冰箱內樣本不宜過滿，留出空氣循環空間，確保溫度均勻。
也不宜過空，內部熱容量小，溫度波動大。可放置空盒子或乙醇瓶增加熱慣性。
四、日常維護與監控
溫度監控：
每日檢查并記錄冰箱顯示溫度。
使用獨立的溫度記錄儀或遠程監控系統，實時報警。
定期校準內置溫度傳感器。
定期除霜：
當蒸發器結霜過厚（>5mm）時，影響制冷效率。
按規程進行手動或自動除霜，轉移樣本至備用冰箱。
除霜后徹d干燥再重新啟動。
清潔與消毒：
定期清潔內壁、擱架、密封條，使用75%酒精或溫和消毒劑。
防止霉菌、細菌滋生和異味。
備份系統：
關鍵樣本應建立異地備份（如另一臺-80℃冰箱或液氮罐）。
冰箱配備斷電報警、后備電池或備用制冷系統（如液氮補充）。
五、取用與復溫
快速取用：
提前準備好工具（如鑷子、冰盒），迅速取出所需樣本，立即關門。
復溫方法：
快速復溫：將凍存管置于37℃水浴中輕輕搖動，1-2分鐘內融化，避免慢速解凍損傷細胞。
融化后盡快進行后續操作（如離心去除DMSO、接種培養等）。
更新時間：2025-09-25
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